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　　SMB工藝的復雜性要高于傳統LC制備工藝，因此SMB方法開發時對整個過程的設計和控制的要求更高。在SMB方法的開發過程中，確定四個區中目標物的濃度分布可以幫助優化SMB的工藝。最常用的方式就是在萃余液和萃取液出口直接取樣進行HPLC分析，這種取樣方法應用在小試或實驗室規模的SMB過程中比較容易，但對于中試及以上規模的SMB工藝方法來說不是特別適用。

　　AZURA SMB有一種更有效的在線取樣方式，即在色譜柱1的入口前安裝一個手動進樣閥作為取樣閥，在SMB每次切換色譜柱時，該取樣閥會隨著色譜柱1順序移動，這樣它就可以在一個SMB循環周期內，通過手動轉換取樣閥（見圖1）就可以對色譜柱1在四個區內任一位置的進行采樣。

　　圖1 取樣閥及流路

　　在取樣前，手動閥處于Pos.2位置，用注射器將定量環填充滿洗脫液；當取樣開始時，需快速手動切換閥到Pos.1位置，定量環被樣品液充滿后，再轉動閥至Pos.2位置，并用空的注射器將樣品液從定量環中推到一個樣品瓶中。

　　實驗及結果

　　將AZURA LAB SMB系統配置為2:2:2:2模式，這樣在SMB的每個區中均有兩根色譜柱。以乙酰氨基酚和咖啡因作為對象，使用在線取樣的方式對四個區依次取樣，然后對每個取樣進行HPLC測定，以考察它們在四個區中不同色譜柱位置的濃度分布。圖3為乙酰氨基酚和咖啡因的濃度曲線。

　　圖2 咖啡因和對乙酰氨基酚在不同區中的濃度測定色譜圖

　　實際的運行結果顯示，SMB在運行了10個循環后，咖啡因和對乙酰氨基酚達到了穩定狀態。在第11次循環中，在每次色譜柱切換的間隔期的中間時間點進行采樣。圖2顯示了SMB系統的色譜柱配置以及每次采樣色譜圖對應的流路位置。

　　第4區的兩張色譜圖顯示了該區的兩根色譜柱內均不含任何萃余物（乙酰氨基酚），此外，也沒有萃取物（咖啡因）進入第3區。這表明，在分離的有效性方面仍有改進的余地。第2區和3區的流速越大，系統的性能越好。此外，可以通過增加的Feed泵的進樣流速來提高SMB工藝的生產率。通過在線采樣的方式可以非常方便地獲得所有4個區中兩種目標物質的濃度分布的信息，這就可以為我們開發和優化SMB方法提供思路，加快SMB工藝的優化進程。

　　圖3 咖啡因和對乙酰氨基酚在4個區中的濃度分布曲線